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卡介菌多糖核酸制備方法

1、菌種

2、菌株傳代及培養(yǎng)基

按照試行規(guī)程 中卡介菌的菌種傳代要求進行，采用馬鈴薯或液體蘇通培養(yǎng)基。

3、菌體收集

培養(yǎng)瓶經(jīng)逐瓶檢查后，收集菌膜壓干，加人適量蒸餾水，以高速粉碎機破碎菌體后備用。

4、多糖核酸提取

取破碎菌懸液與等量熱酚混勻，靜置分層．離心去菌體，上清透析去酚，加入適量乙醇沉淀多糖、核酸，收集沉淀物，分別以乙醇混勻洗滌，離心后干燥即得半成品。

5、稀釋及分裝

從制備工藝不難發(fā)現(xiàn)，多糖核酸的提取率，很大程度上取決了菌體收集的環(huán)節(jié)，菌體收集環(huán)節(jié)*重要的就是對菌體的破碎。傳統(tǒng)破碎菌體的設(shè)備為高速粉碎機，由于自身的剪切力對于菌體的破碎程度不高，導(dǎo)致提取環(huán)節(jié)多糖核酸的提取率很低。

上海依肯實驗表明，使用依肯的研磨分散機，菌體的破碎程度更高，多糖核酸的提取可達70-80%。提高了卡介菌多糖核酸的活性和性能，從而更好的制備出卡介菌多糖核酸注射液等醫(yī)藥品，更好的應(yīng)用于醫(yī)療行業(yè)。

卡介菌多糖核酸研磨分散機的概述

卡介菌多糖核酸研磨分散機是IKN（上海）公司經(jīng)過研究剛剛研發(fā)出來的一款新型產(chǎn)品，該機特別適合于需要研磨分散乳化均質(zhì)一步到位的物料。我們將三級高剪切均質(zhì)乳化機進行改裝，我們將三級變跟為一級，然后在乳化頭上面加配了膠體磨磨頭，使物料可以先經(jīng)過膠體磨細化物料，然后再經(jīng)過乳化機將物料分散乳化均質(zhì)。對于菌體的破碎有的超強的剪切力，可以充分的將菌體破碎開，從而提高多糖核酸的提取率。

卡介菌多糖核酸研磨分散機的特點：

① 線速度很高，剪切間隙非常小，當物料經(jīng)過的時候，形成的摩擦力就比較劇烈，結(jié)果就是通常所說的濕磨

② 定轉(zhuǎn)子被制成圓椎形，具有精細度遞升的三級鋸齒突起和凹槽。

③ 定子可以無限制的被調(diào)整到所需要的與轉(zhuǎn)子之間的距離

④ 在增強的流體湍流下，凹槽在每級都可以改變方向。

⑤ 高質(zhì)量的表面拋光和結(jié)構(gòu)材料，可以滿足不同行業(yè)的多種要求。
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卡介菌多糖核酸高速膠體磨技術(shù)參數(shù)

CMD2000系列膠體磨選型表

型號	流量 L/H	轉(zhuǎn)速 rpm	線速度 m/s	功率 kw	入/出口連接 DN
CMD2000/4	300	9000	23	2.2	DN25/DN15
CMD2000/5	1000	6000	23	7.5	DN40/DN32
CMD2000/10	2000	4200	23	22	DN80/DN65
CMD2000/20	5000	2850	23	37	DN80/DN65
CMD2000/30	8000	1420	23	55	DN150/DN125
CMD2000/50	15000	1100	23	110	DN200/DN150